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MiR-133a-5p顺利获得靶向ATP7B促进肝癌细胞铜死亡

 

Authors Ren Q , Zhu X, Wang N, Yu K , Lv W, Wang L, Zang Y, Ma D, Zhou X, Yao J, Shen M, Yu L, Li T

Received 4 January 2025

Accepted for publication 13 May 2025

Published 22 May 2025 Volume 2025:18 Pages 6607—6622

DOI http://doi.org/10.2147/JIR.S515647

Checked for plagiarism Yes

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Peer reviewer comments 2

Editor who approved publication: Dr Durga Prasanna Misra

任俏慧1，朱欣悦1，王楠楠1，余康1，吕伟1，王莲子1，臧 艳1，马东玥1，周心怡1，姚骏骁1，申梦娇1，李 涛1，余莉2

作者单位：1安徽医科大学第一附属医院检验科，合肥 230032

2安徽医科大学病原生物学安徽省重点实验室，合肥 230032

摘要

目的：在铜死亡的基础上，我们探讨了miR133a-5p和ATP7B对肝癌细胞铜死亡的影响。

方法：第一时间顺利获得CCK-8实验、细胞划痕实验和流式细胞术探究了miR-133a-5p对肝细胞癌（HCC）的作用。随后使用伊利司莫联合铜离子诱导HCC细胞系PLC/PRF/5和Huh-7发生铜死亡，并采用CCK-8实验、细胞划痕实验、流式细胞术及Western blotting检测了miR-133a-5p对铜死亡的调控作用。顺利获得生物信息学预测miR-133a-5p潜在下游靶基因，并采用双荧光素酶报告基因实验验证结合位点。最后顺利获得细胞转染实验调控miR-133a-5p表达，验证其对ATP7B的调控作用。

结果：CCK-8实验、细胞划痕实验和流式细胞术结果显示，miR-133a-5p显著抑制HCC细胞增殖、迁移并促进其死亡。伊利司莫联合铜离子能够诱导肝癌细胞发生铜死亡。与对照组相比，miR-133a-5p能进一步抑制肝癌细胞增、迁移、促进细胞死亡，并更显著提升铜死亡相关蛋白的表达水平。生物信息学分析提示ATP7B可能是miR-133a-5p的下游靶基因，双荧光素酶实验证实两者存在结合位点。并且ATP7B表达水平随miR-133a-5p的调控而发生改变。

结论：miR133a-5p顺利获得靶向ATP7B促进肝癌细胞铜死亡。

关键词：铜死亡，miRNA，ATP7B，肝细胞癌

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